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磁珠是一類具有超順磁性的磁納米粒子。所謂超順磁性，是指磁珠在外磁場的作用下具有弱磁性，容易被吸附，撤去磁場后沒有剩磁，容易被分散。

磁珠的結構一般包含磁性的內核（通常為鐵的衍生物）、具有良好生物相容性的外殼 以及 外殼上偶聯的各種配體（如羧基、氨基等官能團或Protein A/G、抗體等生物大分子）。下圖為羧基磁珠示意圖。

磁珠之所以能在蛋白互作上大顯身手，突出的特點就是蛋白荷載量高，特異性強，樣品損失小，操作便捷。總之就是簡單加方便！

1. 磁珠與樣品共同孵育，捕獲目的蛋白；

2. 加外磁場吸附磁珠，棄掉上清液；

3. 加入漂洗液漂洗，去掉非特異結合蛋白；

4. 加入洗脫液洗脫，收集目的蛋白。

蛋白純化磁珠常用的配體有Protein A、Protein G、Protein A/G、標簽蛋白抗體、鏈霉親和素蛋白等。

Protein A/G磁珠是在磁珠表面偶聯Protein A/G，而Protein A/G能與IgG相結合，因此可以用來純化各種抗體。Protein A/G磁珠也可以通過結合不同的抗體，形成“磁珠-抗體-抗原”復合物，從而捕獲相應的抗原或互作蛋白。

Protein A/G磁珠工作原理圖

相同工作原理的磁珠還有Protein A磁珠和Protein G磁珠。Protein A和Protein G以及Protein A/G在與不同抗體亞型的結合能力上有所差別，選擇時可以參照下表。Protein A/G由于是Protein A和Protein G抗體識別區域的重組融合蛋白，因此通常在實驗中表現更佳。

需要注意的是，Protein A能與抗體Fc端特異性結合，Protein G不僅能與Fc端結合，還能低親力與Fab端特異性結合。

所以需要純化抗體Fab端的小伙伴，可以選擇Protein A磁珠特異性去除Fc端，這樣就可以獲得Fab端啦！

另外，我司還提供一種瓊脂糖磁珠，與普通磁珠相比，瓊脂糖磁珠的IgG蛋白荷載量更高，更適合用來純化大量的IgG。

根據抗原抗體結合的特異性，研究者將抗體直接與磁珠偶聯，獲得抗體偶聯磁珠，如anti-Flag免疫磁珠、anti-Myc免疫磁珠等，可以用來直接捕獲對應的抗原。

與ProteinA/G磁珠相比，抗體偶聯磁珠不用考慮抗體種屬以及亞型的選擇，操作上也少了磁珠和抗體結合的步驟，大大縮短實驗時間。目前大部分磁珠偶聯的抗體為通用的標簽蛋白抗體，包括Flag、HA、Myc、GST、His等，因此更適合用來捕獲外源表達的標簽融合蛋白。

用Protein A/G磁珠做免疫沉淀試驗（IP）時，沒有捕獲到目的蛋白？

在IP過程中出現非特異性條帶如何處理？

進行Protein A/G磁珠和抗體偶聯磁珠的回收時，需要注意哪些問題？

Protein A/G磁珠和抗體偶聯磁珠回收步驟有哪些？